آمار
| تعداد نشریات | 26 |
| تعداد شماره‌ها | 447 |
| تعداد مقالات | 4,557 |
| تعداد مشاهده مقاله | 5,380,003 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 3,580,074 |
محلول‌سازی و تاخوردگی مجدد اجسام اینکلوژن پروتئین نوترکیب پوششی ویروس برگ بادبزنی مو تولید شده در Escherichia coli | ||
| مجله بیوتکنولوژی کشاورزی | ||
| مقاله 8، دوره 11، شماره 1 - شماره پیاپی 33، خرداد 1398، صفحه 151-167 اصل مقاله (3.09 M) | ||
| نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22103/jab.2019.13125.1090 | ||
| نویسندگان | ||
| راضیه یزدانی1؛ سید شهریار عرب2؛ افشین حسنی مهربان3؛ مسعود شمس بخش* 4 | ||
| 1گروه بیماری شناسی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران | ||
| 2گروه بیوفیزیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس | ||
| 3گروه ویروس شناسی، دانشگاه واخنینگن، واخنینگن، هلند | ||
| 4دانشگاه تربیت مدرس | ||
| چکیده | ||
| هدف: سطوح بالای بیان ژن‌های خارجی در سلول‌های میزبان به ویژه در باکتری‌ها اغلب منجر به تشکیل اجسام اینکلوژن[1] میشود. وجود اسیدآمینه سیستئین در ساختار پروتئینها به تشکیل این اندامک نیز کمک میکند. پیوندهای دیسولفیدی درون و بینمولکولهای پروتئین غنی از سیستئین پوششی ویروس برگ بادبزنی مو باعث تشکیل اجسام اینکلوژن پس از بیان در Escherichia coli میشود. از اینرو به منظور بهدست آوردن پروتئین نوترکیب با ساختار طبیعی، ضروری است پروتئینهای تولید شده در سلول باکتری به شکل محلول درآیند. مواد و روش: در مطالعه حاضر برای تاخوردگی مجدد ساختار پروتئینها از حلال آمفیپاتیک 2 متیل 2،4پنتان دیول (MPD) در حضور سدیم دودسیل سولفات (SDS) استفاده شد. به این منظور ابتدا اجسام اینکلوژن حاوی پروتئین پوششی نامحلول ویروس برگ بادبزنی مو با استفاده از عامل دناتوره کننده سدیم دودسیل سولفات محلول شد. سپس پروتئین پوششی محلول با استفاده از روش کروماتوگرافی اندازه[2] خالصسازی شد و در نهایت پروتئینهای پوششی خالص با استفاده از روش MPD/SDS تاخورده شدند. نتایج: تصاویر میکروسکوپ الکترونی عبوری تاخوردگی مجدد ذرات شبهویروسی برگ بادبزنی مو را تایید کرد. نتیجه گیری: به نظر میرسد حلال MPD سبب تعدیل خواص دناتوره کننده سدیم دودسیل سولفات شده و به این ترتیب روشی ساده، کارآمد و موثر برای تاخوردگی مجدد پروتئین پوششی غنی از سیستئین ویروس برگ بادبزنی مو معرفی شد. [1]- inclusion body [2]- size exclusion chromatography | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| پروتئین غنی از سیستئین؛ کروماتوگرافی اندازه؛ میکروسکوپ الکترونی | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 712 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 562 |
||