آمار
| تعداد نشریات | 26 |
| تعداد شماره‌ها | 447 |
| تعداد مقالات | 4,557 |
| تعداد مشاهده مقاله | 5,380,003 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 3,580,072 |
تکثیر و همسانهسازی ژن آلفاتوکسین باکتری کلوستریدیوم پرفرینجنس در باکتری E. coli | ||
| مجله بیوتکنولوژی کشاورزی | ||
| مقاله 5، دوره 11، شماره 4، اسفند 1398، صفحه 67-86 اصل مقاله (3.67 M) | ||
| نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22103/jab.2020.2524 | ||
| نویسندگان | ||
| حسینعلی ساسان* 1؛ مهین رسانی2؛ سمانه کارآموز2؛ علی اسماعیلی زاده کشکوئیه3؛ مسعود اسدی فوزی4؛ احمد آیت اللهی مهرجردی5 | ||
| 1گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شهید با هنر کرمان، کرمان، ایران | ||
| 2دانشجوی کارشناسی ارشد، بخش مهندسی علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید با هنر کرمان، | ||
| 3دانشگاه شهید باهنر کرمان | ||
| 4دانشیار بخش مهندسی علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران. | ||
| 5بخش مهندسی علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید با هنر کرمان. کرمان، ایران | ||
| چکیده | ||
| اهداف: هدف از انجام این پژوهش، تکثیر و همسانهسازی شکل کامل و همچنین بخش ابتدایی ژن کشنده آلفاتوکسین (α-Toxin) باکتری کلستریدیوم پرفرِینجنس با اندازههای به ترتیب 1100 و 750 جفت باز با استفاده از ناقل بیانی pET28a در باکتری E.coli بود. مواد و روشها: استخراجDNA ژنومی با استفاده از کیت کیاژن صورت گرفت. آغازگرهای جلوبرنده و برگشت در آزمایشگاه طراحی و در ناحیه ابتدایی آغازگرها ردیفهای آنزیمهای برشگر HindIII و XhoI مطابق با ناحیه کلونینگ پلاسمید مورد نظر اضافه گردید. قطعات ژنی مورد نظر با روش PCR معمولی تکثیر و در ناقل pET28a با کمک روش شوک حرارتی کلون شدند. استخراج DNA پلاسمیدی با استفاده از روش لیز قلیایی صورت گرفت. نتایج: نتایج ژل الکتروفورز محصولات PCR، تکثیر واضح و واحد شکل کامل و همچنین بخش ابتدایی قطعات ژنی مورد نظر را مطابق با اندازه های مورد انتظار نشان داد. بعلاوه با استفاده از آزمایش هضم آنزیمی منفرد و دوگانه توسط آنزیم های برشگر HindIII و XhoI همسانه سازی ژنهای آلفاتوکسین در باکتری میزبان و تولید باکتریهای نوترکیب تأیید شد. نتیجهگیری: با توجه به موفقیت آمیز بودن دقیق کلونینگ ژنهای آلفاتوکسین در باکتریهای بیانی میزبان، میتوان گفت که پرایمرهای طراحی شده در این تحقیق برای تکثیر ژن آلفاتوکسین بسیار اختصاصی بوده و به عنوان مارکر شناسایی و طبقه بندی این باکتریها میتوانند استفاده واقع شوند. همچنین با ساخت احتمالی واکسنهای نوترکیب ژنتیکی مهندسیشده میتوان کنترل و مقابله با پاتوژنهای مهمی همچون باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس را امکانپذیر ساخت. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| آلفاتوکسین؛ کلستریدیوم پرفرینجنس؛ همسانهسازی | ||
| مراجع | ||
|
کرمی علی (1381) مقدمه ای برواکسنهای ژنی.تهران انتشارات دانشگاه امام حسین، شماره شابک 9644521293، 2001. ناصری فر راضس، غفاری فر فاطمه، دلیمی اصل عبدالحسین، شریفی زهره (1390) کلونینگ ژن GRA5 توکسوپلاسما گوندای سویه RH در پلاسمید یوکاریوت بیانی pcDNA3 و بیان آن در سلول. مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی ایلام. 19(3)، 12-1.
References
Ahsani MR, Bafti MS, Esmailizadeh AK, Mohammadabadi MR (2011) Genotyping of isolates of Clostridium perfringens from vaccinated and unvaccinated sheep. Small Rumin Res 95, 65-69.
Ahsani MR, Mohammadabadi MR, Shamsaddini MB (2010) Clostridium perfringens isolate typing by multiplex PCR. J Venom Anim Toxin Includ Tropic Dis 16, 573-578.
Anuradha K, Foo HL, Mariana NS Loh TC et al. (2010) Live recombinant Lactococcus lactis vaccine expressing aerolysin genes D1 and D4 for protection against Aeromonas hydrophila in tilapia (Oreochromis niloticus). J Appl Microb 109, 1632–1642.
Claudia EAF, Viviane N, Edison LD, Mario JV (2003) Prevalence of Clostridium spp. and Clostridium difficile in Children with Acute Diarrhea in São Paulo City, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro 98, 451-454.
Evy G, Stefanie V, Bonnie V, Bart P (2016) The C‑terminal domain of Clostridium perfringens alpha toxin as a vaccine candidate against bovine necrohemorrhagic enteritis. Vet Res 47, 52.
Frank M (2004) Clostridial Diseases of Cattle and Sheep: Text of a paper presented at the annual meeting of the Association of Veterinary Surgeons Practising in Northern Ireland, Enniskillen.
Hadizadeh M, Mohammadabadi MR, Niazi A et al. (2013) Use of bioinformatics tools to study exon 2 of GDF9 gene in Tali and Beetal goats. Modern Genet J (MGJ) 8, 283-288.
Hadizadeh M, Niazi A, Mohammad Abadi M et al. (2014) Bioinformatics analysis of the BMP15 exon 2 in Tali and Beetal goats. Modern Genet J 9, 117-120.
Jia-Ning B, Yang Z, Bao-Hua Z (2006) Cloning of α-β fusion gene from Clostridium perfringens and its expression. WJG 12, 1229-1234.
Karami A (2001) Introduction to Genetic Vaccines. Imam Hossein Publications, ISSN: 9644521293.
Marcos R, Ferreira A, Gustavo MSGM, Carlos EPC et al. (2016) Recombinant Alpha, Beta, and Epsilon Toxins of Clostridium perfringens: Production Strategies and Applications as Veterinary Vaccines. Toxin 8, 340.
Mohammadabadi MR (2017) Role of Clostridium perfringens in pathogenicity of some domestic animals. J Adv Agric 7, 1-9.
Negahama M (2013) Vaccines against Clostridium perfringens alpha-toxin. Curr Pharm Biotechnol 14, 913-17.
Naserifar R, Ghaffarifar F, Dalimiasl A, Sharifi Z (2010) Cloning and Expression of GRA5 Gene from toxoplasma gondii RH in eukaryotic pcDNA3. Scientific J Medic Univ Ilam 19, 1-10.
Navarro MA, McClane BA, Uzal FA (2018) Mechanisms of Action and Cell Death Associated with Clostridium perfringens Toxins. Toxin 10, 212e
Neeson BN, Clark GC, Atkins HS, Lingard B et al. (2007) Analysis of protection afforded by a Clostridium perfringens alpha-toxoid against heterologous clostridial phospholipases C. Microb Pathog 43, 161–165.
Naqpal R, Oqata K, Tsuji H, Matsuda K et al. (2015) Sensitive quantification of Clostridium perfringens in human feces by quantitative real-time PCR targeting alpha-toxin and enterotoxin genes. BMC Micro 15, 219e.
Oda M, Kabura M, Takagishi T, Suzue A et al. (2012) Clostridium perfringens Alpha-toxin Recognizes the GM1a-TrkA Complex: J Biol Chem 287, 33070-9.
Oda M, Kihara A, Yoshioka H, Saito Y et al. (2008) Effect of Erythromycin on Biological Activities Induced by Clostridium perfringens α-Toxin. JPET 327, 934–940.
Oda M, Yutaka T, Jun S, Masahiro N (2015) Membrane-Binding Mechanism of Clostridium perfringens Alpha-Toxin. Toxin 7, 5268–5275.
Radhika B, Kumar NV, Sreenivasulu D (2016) Detection of Clostridium perfringens alpha toxin gene in lambs by loop mediated isothermal amplification. Vet World 9, 60-64.
Sakurai J, Negahama M, Oda M (2004) Clostridium perfringens Alpha- Toxin: Characterization and Mode of Action. J Biochem 136, 569–574.
Sakurai J, Negahama M, Oda M, Tsuge H et al. (2009) Clostridium perfringens Iota-Toxin: Structure and Function: Toxin 1, 208-228.
Sasan H (2007) Cloning and expression of aerolysin and metalloprtease genes from a locally isolated aeromonas hydrophila in Escherchia coli and lactococcus lactis and the effects of the recombinant lactococcus lactis on tilapia, PhD Thesis, UPM pp:150-220.
Sasan H (2010) Cloning of EprA1 gene of Aeromonas hydrophila in Lactococcus lactis, IJB 8, 193-198.
Schoepe H, Neubauer A, Schlapp T, Weiler LH et al. (2006) Immunization with an alpha toxin variant 121A/91-R212H protects mice against Clostridium perfringens alphatoxin. Anaerobe 12, 44–8.
Shahdadnejad N, Mohammadabadi MR, Shamsadini M (2016) Typing of Clostridium Perfringens Isolated from Broiler Chickens Using Multiplex PCR. Genet Third millennium 14, 4368-4374.
Shimizu T, Ohtani K, Hirakawa H, Yamashita A et al. (2002) Complete genome sequence of Clostridium perfringens, an anaerobic flesheater. Proc Natoin Acad Sci 99, 996-1001.
Siu-Tong L and Ming KL (2012) A middle-aged lady with a pyogenic liver abscess caused by Clostridium perfringens. World J Hepatol 4, 252-255.
Stevens DL, Titball RW, Jepson M, Bayer CR et al. (2004) Immunization with C-domain of alpha-toxin prevents lethal infection, localises tissue injury and promotes host response to challenge with viable Clostridium perfringens. J Infect Dis 190, 767–773.
Williamson ED, Titball RW (1993) A genetically engineered vaccine against the alpha-toxin of Clostridium perfringens protects mice against experimental gas gangrene. Vaccine 11, 1253–8.
Zandi E, Mohammadabadi MR, Ezzatkhah M, Esmailizadeh AK (2014) Typing of Toxigenic Isolates of Clostridium Perfringens by Multiplex PCR in Ostrich. Iran J Appl Anim Sci 4, 509-514.
Yuan T, Ming W, Bin L, Jianzhong C et al. (2012) Detection, cloning, and sequencing of the enterotoxin gene of Clostridium perfringens type C isolated from goat: Turk J Vet Anim 36, 153-158. | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 593 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 462 |
||