آمار
| تعداد نشریات | 26 |
| تعداد شماره‌ها | 447 |
| تعداد مقالات | 4,557 |
| تعداد مشاهده مقاله | 5,380,001 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 3,580,066 |
طراحی و ساخت کاست رمزکننده عامل رشد اپیدرمی انسانی برای بیان در بذر گیاه جو | ||
| مجله بیوتکنولوژی کشاورزی | ||
| دوره 13، شماره 4، دی 1400، صفحه 55-80 اصل مقاله (1.56 M) | ||
| نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22103/jab.2021.18081.1335 | ||
| نویسندگان | ||
| شاهرخ گروسی1؛ سدابه جهانبخش گده کهریز* 2؛ کسری اصفهانی3؛ تهمینه لهراسبی4؛ امیر موسوی5؛ علی هاتف سلمانیان6 | ||
| 1گروه مهندسی تولید و ژنتیک به نژادی ، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران- دانشجوی دکتری بیوتکنولوژی | ||
| 2گروه مهندسی تولید و ژنتیک به نژادی ، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل، ایران | ||
| 3تهران پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری | ||
| 4گروه زیست‌فرآورده‌های گیاهی، پژوهشکده زیست‌فناوری کشاورزی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست‌فناوری، تهران، ایران | ||
| 5هیات علمی | ||
| 6پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، پژوهشکده زیست فناوری کشاورزی، گروه زیت فراورده های گیاهی تهران کیلومتر 15 اتوبان کرج- | ||
| چکیده | ||
| هدف: گیاهان کارآیی بسیاری در تولید پروتئین‌های ارزشمند دارویی دارند. عامل رشد اپیدرمی انسانی، اثرات بی‌شماری بر روی سیستم‌های مختلف سلولی داشته و نقش مهمی در بهبودی زخم‌ها و اندام‌زایی دارد. هدف از پژوهش اخیر ساخت سازه‌های ویژه تک‌لپه‌ای‌ها برای انتقال بعدی ژن عامل رشد اپیدرمی و تولید انبوه آن در یک گیاه تک‌لپه‌ای خودگشن یعنی جو بود. گیاه جو با داشتن عملکرد پروتئینی بالا و دگرگشنی بسیار پایین، میزبان ایده‌الی برای تولید عامل رشد اپیدرمی است. مواد و روش‌ها: به‌منظور دسترسی به بالاترین میزان بیان عامل رشد اپیدرمی در بذر جو، توالی ژن موردنظر بر اساس ترجیح کدونی گیاه جو با نرم‌افزار COOL بهینه و همراه با پیش‌بر اختصاصی دی‌هوردئین سنتز شد. همچنین توالی راهنمای پپتیدی اندامک ذخیره‌ای پروتئین در بذر جو در ابتدای ناحیه رمزکننده قرار گرفت. پس از دریافت قطعه سنتزی در ناقل pUC57Hvorhegf، آن قطعه توسط آنزیم‌های SacI و HindIII از ناقل جدا و در پلاسمید pBI121 همسانه‌سازی شد. در گام بعدی همسانه‌سازی، برای درج توالی ژن موردنظر در ناقل pGH215، به دلیل نبود جایگاه‌های شناسایی یکسان در این ناقل‌ها، از ناقل حدواسط pBI121Gus-12 استفاده شد. بعد از برش ناقل همسانه‌سازی و pBI121Gus-12 توسط آنزیم‌های SacI و KpnI، همسانه‌سازی قطعه موردنظر در pBI121Gus-12 انجام گرفت. در گام آخر، ناقل pBI121G-12Hvorhegf و pGH215 با آنزیم‌های KpnI و SalI هضم شده و توالی موردنظر در مرز راست T-DNA و قبل از پایان دهنده NOS قرار گرفت. نتایج: با استفاده از آزمون کلونی پی‌سی‌آر، الگوی هضم آنزیمی و توالی‌یابی با آغازگرهای رفت‌وبرگشت، درستی همسانه‌سازی و تولید ناقل‌های pBI121Hvorhegf واجد ژن hegf با نشانگر کانامایسین و pGH215Hvorhegf واجد ژن hegf با نشانگر هیگرومایسین، مناسب برای انتقال ژن در تک‌لپه‌ای‌ها تائید شد. نتیجه‌گیری: ناقل بیانی نوترکیب pGH215 تغییریافته دارای کاست ژنی موردنظر همراه با نشانگر هیگرومایسین می‌تواند برای انتقال ژن موردنظر در تک‌لپه‌ای‌ها و بیان پروتئین نوترکیب در اندام ذخیره‌ای بذر استفاده شود. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| اگروباکتریوم تومه‌فاشینس؛ تک‌لپه‌ای؛ همسانه‌سازی | ||
| مراجع | ||
|
احسنی محمدرضا، محمدآبادی محمدرضا، اسدی فوزی و همکاران (1398) بیان ژن لپتین در بافت چربی زیرپوستی گاوهای هلشتاین با استفاده از Real Time PCR. مجله بیوتکنولوژی کشاورزی 11(1)، 150-135.
توحیدی‌نژاد فاطمه، محمدآبادی محمدرضا، اسمعیلی‌زاده کشکوئیه علی، نجمی نوری عذرا (1393) مقایسه سطوح مختلف بیان ژنRheb در بافت های مختلف بز کرکی راینی. مجله بیوتکنولوژی کشاورزی 6(4)، 50-35.
جعفری دره در امیر حسین، محمدآبادی محمدرضا، اسمعیلی زاده کشکوئیه علی، ریاحی مدوار علی (1395) بررسی بیان ژن CIB4 در بافت‌های مختلف گوسفند کرمانی با استفاده از Real Time qPCR. مجله پژوهش در نشخوارکنندگان 4(4)، 132-119.
محمدآبادی محمدرضا (1399) بیان ژن ESR1 در بز کرکی راینی با استفاده از Real Time PCR. مجله بیوتکنولوژی کشاورزی 12(1)، 192-177.
محمدآبادی محمدرضا (1399) پروفایل بیانی mRNA مختص بافت ژن ESR2 در بز. مجله بیوتکنولوژی کشاورزی 12(4)، 181-167.
محمدآبادی محمدرضا، کرد محبوبه، نظری محمود (1397) مطالعه بیان ژن لپتین در بافت‌های مختلف گوسفند کرمانی با استفاده از .Real Time PC مجله بیوتکنولوژی کشاورزی 10 (۳)، 111-122.
References
Ahsani MR, Mohammadabadi MR, Asadi Fozi M et al. (2019a) Effect of Roasted Soybean and Canola Seeds on Peroxisome Proliferator‐Activated Receptors Gamma (PPARG) Gene Expression and Cattle Milk Characteristics. Iran J Appl Anim Sci 9, 635-642.
Ahsani MR, Mohammadabadi MR, Asadi Fozi M et al. (2019b) Leptin gene expression in subcutaneous adipose tissue of Holstein dairy cattle using Real Time PCR. Agric Biotechnol J 11, 135-150 (In Persian).
Aragão FJL, Brasileiro ACM (2002) Positive, negative and marker-free strategies for transgenic plant selection. Braz J Plant Physiol 14, 01–10.
Basaran P, Rodríguez-Cerezo E (2008) Plant molecular farming: opportunities and challenges. Crit Rev Biotechnol 28, 153–172.
Bibi N, Fan K, Yuan S, et al. (2013) An efficient and highly reproducible approach for the selection of upland transgenic cotton produced by pollen tube pathway method. Aust J Crop Sci 7, 1714–1722.
Chen PY, Wang CK, Soong SC, To KY (2003) Complete sequence of the binary vector pBI121 and its application in cloning T-DNA insertion from transgenic plants. Mol 11, 287–293.
Dafny-Yelin M, Tzfira T (2007) Delivery of multiple transgenes to plant cells. Plant Physiol 145, 1118–1128.
Goedeke S, Hensel G, Kapusi E, et al. (2007) Transgenic barley in fundamental research and biotechnology. Transgenic Plant J 1, 104–117.
Himmelbach A, Zierold U, Hensel G, et al. (2007) A set of modular binary vectors for transformation of cereals. Plant Physiol 145, 1192–1200.
Huang TK, McDonald KA (2012) Bioreactor systems for in vitro production of foreign proteins using plant cell cultures. Biotechnol Adv 30, 398–409.
Ishida Y, Tsunashima M, Hiei Y, Komari T (2015) Wheat (Triticum aestivum L.) transformation using immature embryos. In: Agrobacterium protocols. Springer, 189–198.
Jafari Darehdor AH, Mohammadabadi MR, Esmailizadeh Kashkoueieh A, Riahi Madvar A (2016) Investigating expression of CIB4 gene in different tissues of Kermani Sheep using Real Time qPCR. J Ruminant Research 4 (4), 119-132.
Ji Q, Xu X, Wang K (2013) Genetic transformation of major cereal crops. Int J Dev Biol 57, 495–508.
Komari T, Takakura Y, Ueki J, et al. (2006) Binary vectors and super-binary vectors. Agrobacterium protocols, 15–42.
Kumlehn J, Hensel G (2009) Genetic transformation technology in the Triticeae. Breed Sci 59, 553–560.
Low LY, Yang SK, Andrew Kok D, et al. (2018) Transgenic plants: gene constructs, vector and transformation method. New visions in plant science. Intech Open London, 41–61.
Marthe C, Kumlehn J, Hensel G (2015) Barley (Hordeum vulgare L.) transformation using immature embryos. In: Agrobacterium Protocols Springer, 71–83.
Masoudzadeh SH, Mohammadabadi M, Khezri A, et al. (2020) Effects of diets with different levels of fennel (Foeniculum vulgare) seed powder on DLK1 gene expression in brain, adipose tissue, femur muscle and rumen of Kermani lambs. Small Rumin Res 193, e106276.
Miki B, McHugh S (2004) Selectable marker genes in transgenic plants: applications, alternatives and biosafety. J Biotechnol 107, 193–232.
Mohammadabadi M (2021) Tissue-specific mRNA expression profile of ESR2 gene in goat. Agric Biotechnol J 12 (4), 167-181 (In Persian).
Mohammadabadi MR (2020) Expression of ESR1 gene in Raini Cashmere goat using Real Time PCR. Agric Biotechnol J 12 (1), 177-192 (In Persian).
Mohammadabadi MR, Kord M, Nazari M (2018) Studying expression of leptin gene in different tissues of Kermani Sheep using Real Time PCR. Agric Biotechnol J 10, 111-122 (in Persian).
Mohammadabadi MR, Tohidinejad F (2017) Charachteristics determination of Rheb gene and protein in Raini Cashmere goat. Iran J Appl Anim Sci 7, 289-295.
Obembe OO, Popoola JO, Leelavathi S, Reddy SV (2011) Advances in plant molecular farming. Biotechnol Adv 29, 210–222.
Patel TB, Bertics PJ (2006) Epidermal growth factor: methods and protocols. Springer Science & Business Media.
Sahoo DK, Dey N, Maiti IB (2014) pSiM24 is a novel versatile gene expression vector for transient assays as well as stable expression of foreign genes in plants. PLoS One 9, e98988.
Sambrook J, Russell DW (2006) Fragmentation of DNA by sonication. Cold spring harbor protocols 2006, pdb-prot4538.
Sharma K, Babu PC, Sasidhar P, et al. (2008) Recombinant human epidermal growth factor inclusion body solubilization and refolding at large scale using expanded-bed adsorption chromatography from Escherichia coli. Protein Expr Purif 60, 7–14.
Shrawat AK, Lörz H (2006) Agrobacterium‐mediated transformation of cereals: a promising approach crossing barriers. Plant Biotechnol J 4, 575–603.
Tohidinejad F, Mohammadabadi MR, Esmailizadeh AK, Najmi Noori A (2015) Comparison of different levels of Rheb gene expression in different tissues of Raini Cashmir goat. Agric Biotechnol J 6, 35-50.
Tzfira T, Kozlovsky SV, Citovsky V (2007) Advanced expression vector systems: new weapons for plant research and biotechnology, 1087-1089.
Zeng F, Harris RC (2014) Epidermal growth factor, from gene organization to bedside. In: Elsevier, 2–11. | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 722 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 357 |
||