
تعداد نشریات | 26 |
تعداد شمارهها | 447 |
تعداد مقالات | 4,557 |
تعداد مشاهده مقاله | 5,379,998 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 3,580,062 |
مقایسه فعالیت احیایی سه ایزوفرم تیوردوکسین گیاه برنج (Oryza sativa) در واکنش با انسولین | ||
مجله بیوتکنولوژی کشاورزی | ||
مقاله 3، دوره 4، شماره 1، شهریور 1391، صفحه 35-48 اصل مقاله (295.49 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22103/jab.2012.466 | ||
نویسندگان | ||
زهرا پاپ زن1؛ آذر شاه پیری* 2 | ||
1کارشناس ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان | ||
2استادیار گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان | ||
چکیده | ||
تیوردوکسینها (Trxs) پروتئینهایی با وزن مولکولی 14-12 کیلودالتون هستند که با داشتن یک گروه تیول-دی سولفید در جایگاه فعالشان (WCG/PPC)، در احیاء برگشتپذیر پیوندهای دیسولفیدی نقش دارند. ایزوفرمهای مختلفی از Trx در گیاهان وجود دارند. ایزوفرمهای f، m، x و y در کلروپلاست، ایزوفرم o در میتوکندری و ایزوفرم h در سیتوزول یافت می شوند. Trx h دارای اهمیت اساسی در رشد و نمو گیاه است. در پژوهش حاضر، توالی ژن های کد کنندهی سه ایزوفرم Trx h از گیاه برنج، با نام های OsTrx1، OsTrx20 و OsTrx23 جداسازی و همسانه سازی شدند. جهت تولید پروتئین نوترکیب، ژن ها در پلاسمید بیانی pET-15b، همسانه سازی و سپس به سویهی مناسبی از باکتری اشریشیا کلی به نام Rosetta (DE3) منتقل شدند. با تحریک پروموتر T7 به وسیلهی IPTG، میزان مناسبی از پروتئینهای نوترکیب تولید و با استفاده از روش کروماتوگرافی جذبی خالصسازی شدند. فعالیت احیایی سه ایزوفرم نوترکیب تولید شده با استفاده از انسولین به عنوان سوبسترای الکترون گیرنده و DTT به عنوان عامل احیا کننده اولیه مورد مقایسه قرار گرفت. هر سه ایزوفرم نوترکیب تولید شده فعال و قادر به احیای انسولین بودند. با این حال سرعت احیای انسولین در واکنش ها کاملا متفاوت بود که می تواند منعکس کننده تفاوت در فعالیت این ایزوفرمها در گیاه و در نتیجه احتمال تفاوت در نقش آن ها نیز باشد | ||
کلیدواژهها | ||
برنج؛ تیوردوکسین؛ همسانهسازی؛ بیان هترولوگ پروتئین؛ انسولین؛ فعالیت احیایی | ||
اصل مقاله | ||
: Rice, Thioredoxin, Cloning, Heterologous protein expression, Insulin, Reduction activity. | ||
مراجع | ||
Alkhalfioui F, Renard M, William HV, Wong J, Charlene KT, William JH, Buchanan BB, Montrichard F (2007). Thioredoxin-linked proteins are reduced during germination of medicago truncatula seeds. Plant Physiology 144: 1559–1579.
Besse I, Wong JH, Kobrehel K, Buchanan BB (1996). Thiocalsin: a thioredoxin-linked, substrate-specific protease dependent on calcium. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 93: 3169-3175.
Bréhélin C, Laloi C, Setterdahl AT, Knaff DB, Meyer Y (2004). Cytosolic, mitochondrial thioredoxins and thioredoxin reductases in Arabidopsis thaliana. Photosynthesis Research 79: 295-304.
Buchanan BB, Balmer Y (2005). Redox regulation: A broadening horizon. Annual Review of Plant Biology 56: 187-220.
Cazalis R, Pulido P, Aussenac T, Pérez-Ruiz JM, Cejudo FJ (2006). Cloning and characterization of three thioredoxin h isoforms from wheat showing differential expression in seeds. Journal of Experimental Botany 57: 2165-2172.
Gelhaye E, Rouhier N, Vlamis-Gardikas A, Girardet JM, Sautie`re PE, Sayzet M, Martin F, Jacquot JP (2003). Identification and characterization of a third thioredoxin h in poplar. Plant Physiology and Biochemistry 41: 629–635.
Gelhaye E, Rouhier N, Jacquot JP (2004). The thioredoxin h system of higher plants. Plant Physiology and Biochemistry 42: 265-271.
Hirasawa M, Schürmann P, Jacquot JP, Manieri W, Jacquot P, Keryer E, Hartman FC, Knaff DB (1999). Oxidation-reduction properties of chloroplast thioredoxins, ferredoxin:thioredoxin reductase, and thioredoxin f-regulated enzymes. Biochemistry 38: 5200-5205.
Holmgren A (1979). Thioredoxin catalyzes the reduction of insulin disulfides by dithiothreitol and dihydrolipoamide The Journal of Biological Chemistry 254: 9627-9632.
Ishiwatari Y, Honda C, Kawashima I, Nakamura S, Hirano H, Mori S, Fujiwara T, Hayashi H, Chino M (1995). Thioredoxin h is one of the major proteins in rice phloem sap. Planta 195: 456-463.
Kobrehel K, Yee BC, Buchanan BB (1991). Role of the NADP/thioredoxin system in the reduction of alpha-amylase and trypsin inhibitor proteins. The Journal of Biological Chemistry 266: 16135-16140.
Kobrehel K, Wong JH, Balogh A, Kiss F, Yee BC, Buchanan BB (1992). Specific reduction of wheat storage proteins by thioredoxin h. Plant Physiology 99: 919-924.
Lozano RM, Wong JH, Yee BC, Peters A, Kobrehel K, Buchanan BB (1996). New evidence for a role for thioredoxin h in germination and seedling development. Planta 200: 100-106.
Maeda K, Finnie C, Østergaard O, Svensson B (2003). Identification, cloning and characterization of two thioredoxin h isoforms, HvTrxh1 and HvTrxh2, from the barley seed proteome. . European Journal of Biochemistry 270: 2633-2643.
Meyer Y, Vignols F, Reichheld JP (2002). Classification of plant thioredoxins by sequence similarity and intron position. Methods in Enzymology 347: 394-402.
Meyer Y, Reichheld JP, Vignols F (2005). Thioredoxins in Arabidopsis and other plants. Photosynthesis Research 86: 419-433.
Montrichard F, Alkhalfioui F, Yano H, Vensel WH, Hurkman WJ, Buchanan BB (2009). Thioredoxin targets in plants: the first 30 years. Journal of proteomics 72: 452-474.
Mouaheb N, Thomas D, Verdoucq L, Monfort P, Meyer Y (1998). In vivo functional discrimination between plant thioredoxins by heterologous expression in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 95: 3312-3317.
Nuruzzaman M, Gupta M, Zhang Ch, Wang L, Xie L, Xiong L, Zhang Q, Lian X (2008). Sequence and expression analysis of the thioredoxin protein gene family in rice. Molecular Genetics & Genomics 280: 139-151.
Renard M, Alkhalfioui F, Schmitt-Keichinger C, Ritzenthaler C, Montrichard F (2011). Identification and characterization of thioredoxin h isoforms differentially expressed in germinating seeds of the model legume Medicago truncatula. Plant Physiology 155: 1113-1126.
Schürmann P, Jacquot JP (2000). Plant thioredoxin system revisited. Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology 51: 371-400.
Shahpiri A, Svensson B, Finnie Ch (2009). From proteomics to structural studies of cytosolic/mitochondrial-type thioredoxin systems in barley seeds. Molecular Plant 1-12.
Shahpiri A, Svensson B, Finnie Ch (2008). TheNADPH-Dependent Thioredoxin Reductase/Thioredoxin System in Germinating Barley Seeds: Gene Expression, Protein Profiles, and Interactions between Isoforms of Thioredoxin h and Thioredoxin Reductase. Plant Physiology 146: 789–799.
Xie G, Kato H, Sasaki K, Ryozo I (2009). A cold-induced thioredoxin h of rice, OsTrx23, negatively regulates kinase activities of OsMPK3 and OsMPK6 in vitro. FEBS letter 583: 2734–2738.
| ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,879 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,813 |