
تعداد نشریات | 26 |
تعداد شمارهها | 447 |
تعداد مقالات | 4,557 |
تعداد مشاهده مقاله | 5,380,003 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 3,580,068 |
رونویسی غیر متعارف cDNA ژن فعال کننده پلاسمینوژن انسانی (t-PA) در گیاهان تراریخت توتون | ||
مجله بیوتکنولوژی کشاورزی | ||
مقاله 3، دوره 3، شماره 1، خرداد 1390، صفحه 31-41 اصل مقاله (265.97 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22103/jab.2012.459 | ||
نویسندگان | ||
مختار جلالی جواران* 1؛ حیدر سیفی نبی آباد2؛ محمد مهدی یعقوبی3؛ سامان حسینخانی4 | ||
11عضو هیئت علمی دانشکده کشاورزی دانشگاه تربیت مدرس | ||
2دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی دانشگاه تربیت مدرس | ||
3عضو هیئت علمی مرکز بین المللی علوم، تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی | ||
4عضو هیئت علمی دانشکده علوم زیستی دانشگاه تربیت مدرس | ||
چکیده | ||
پروتئین rt-PA یک عامل اختصاصی فیبرین است که موجب حل کردن لخته های خونی و جلوگیری از سکته های قلبی و مغزی میگردد. این پروتئین به فرم دارویی در میزبانهای مختلف بصورت نوترکیب تولید شده است. هدف از این طرح بررسی بیان آن در گیاهان توتون تراریخت بودکه در آن مورد جالبی از نحوه رونویسی ژن در گیاهان تراریخت مشاهده گردید. رونویسی ژن با استفاده از آغازگرهای اختصاصی به روش RT-PCR انجام گرفت. نتایج روی الکتروفرز ژل آگارز 8/0 درصد نشان داد که علاوه بر نوار اختصاصی t-PA (1.7 kb) یک محصول غیر منتظره دیگر به طولbp 650 هم در گیاهان تراریخت تکثیر می شد. پس از بازیابی آن قطعه از ژل و توالی یابی، مشخص شد که این محصول اضافی با cDNA مربوط به ژن t-PA 99% همولوژی دارد. به عبارت دیگر این باند اضافی دارای بخشی از توالی cDNAی ژن t-PA می باشد. در ادامه توالی قطعه اضافی با نرم افزار MegAlign با توالی cDNA ژن t-PA همردیف شد تا نواحی همپوشان و نیز نواحی حذف شده از این قطعه مشخص شود. در نهایت از پایگاه اطلاعاتی CDD موجود در NCBI جهت مشخص کردن دامنه های حذف شده و باقی مانده استفاده شد. نتایج این بررسی نشان داد که توالی مربوط به دامنه کرینگل ها حذف و توالی مربوط به دامنه سرین پروتئازی آن باقی مانده است. از طرفی این دمین سرین پروتئازی می باشد که کار اصلی t-PA را انجام میدهد به گونهای که مهندسین ژنتیک در تلاش برای تولید پروتئینی از t-PA می باشند که فقط دارای همین دمین پروتئازی باشد. در حالی که در اینجا گیاه این کار مهندسی را به صورت طبیعی انجام میدهد. این نتایج احتمالاً به علت پردازش متغیر RNA می باشد | ||
کلیدواژهها | ||
: توتون تراریخت؛ دمین؛ کرینگل و t-PA نوترکیب | ||
اصل مقاله | ||
Domain, Kringle, recombinant t-PA and transgenic tobacco.
| ||
مراجع | ||
Bachmann F (1994). Molecular aspects of plasminogen, plasminogen activators and plasmin. In Hemostasis and Thrombosis. Bloom AL, Forbes CD, Thomas DP, Tuddenham EGD (eds), third edition, Churchill Livingstone, Edinburgh. 575-613.
Brondyk W H (2009). Chapter 11 Selecting an Appropriate Method for Expressing a Recombinant Protein. Methods in enzymology 463: 131–147.
Brown TA (1998). Gene Cloning. Blackwell Science LTD. PP. 50-56. 3rd edition
Bruen KJ, Ballard JR, Morris SE, Cochran A, Edelman LS, Saffle JR (2007). Reduction of the incidence of amputation in frostbite injury with thrombolytic therapy. Surgery 6: 546–51.
Collen D, Lijnen HR (1991). Basic and clinical aspects of fibrinolysis and thrombolysis. Blood 12: 3114-3124.
Daniell H, Stephen JS and Wycoff K (2001). Medical molecular farming. Prodaction of antibodies biophamaceuticals and edible vaccines in plants. plant Science 615: 219-26.
Fischer R, Stoger E, Schillberg S, Christou P and Twyman RM (2004). Plant-based production of biopharmaceuticals. Plant Biology 7: 152–158.
Frank A (1995). t-PA, Product Monograph Copyright © 1995 Chromogenix AB. Version 1.1. Sweden.
Gaffney PJ, Longstaff C (1994). An overview of fibrinolysis. In: Hemostasis and Thrombosis. Bloom AL, Forbes CD, Thomas DP, Tuddenham EGD (eds), third edition, Churchill Livingstone, Edinburgh. 549-571.
Henkin J, Marcotte P, Yang H (1991). The plasminogen-plasmin system. Cardial Disease 2: 135-164.
Masoumi asl A (2009). Cloning and transformation of human t-PA gene to tobacco plants and analysis of transgenic plants. Ph.D. Thesis. Department of plant breeding, faculty of agriculture, tarbiat mofares university. Tehran-Iran.
Mayer M (1990). Biochemical and biological aspects of the plasminogen activation system. Clincal Biochemistry 23: 197-211.
Mosher DF (1990). Blood coagulation and fibrinolysis: an overview. Clinical Cardiology 13: 5-11.
Pan H, Yang CP, Wei ZG and Jiang J (2006). DNA extraction of birch leaves by improved CTAB method and optimization of its ISSR system. Forestry Research 17: 298-300.
Schillberg S, Zimmermann S, Voss A, and Fisher R (1999). Apoplastic and cytosolic expression of full size antibodies and antibodies fragments in Nicotiana tabacum. Transgenic Research 8: 217-221.
Sonya N (2005). Molecular farming. Science and Technology Division Canadian Library of Parliament. http://www2.parl.gc.ca/Content/LOP/ResearchPublications/prb0509-e.htm. Retrieved 2008-09-11.
Von FT, McDiarmid T, MacKler L, Zolotor A (2008). Clinical inquiries: Can recombinant growth hormone effectively treat idiopathic short stature? family practice. 57: 611–612.
Wiman B, Hamsten A (1990) The fibrinolytic enzyme system and its role in the etiology of thromboembolic disease. Seminar Thromb Haemostas 3: 207-216.
| ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,496 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,481 |